本文作者:酷宝

凝胶电泳为什么没有条带(凝胶电泳为什么没有条带显色)

酷宝 2024-10-04 17:45:02 47
凝胶电泳为什么没有条带(凝胶电泳为什么没有条带显色)摘要: 可能有蛋白污染,所以都堵在点样空,你看到的白色沉淀可能就是蛋白含量太高,2 操作太剧烈,活有DNase 污染,DNA都降解成小片段,跑出胶,到此,以上就是小编对于凝胶电泳为什么没有...

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我们跑了变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后,没有看见条带,是跑的时间太长了么...

首先确认你的Loading Buffer中的溴酚蓝有没有跑出去。另外,不知你是跑的场强多大,如果是Mini胶的话216V,跑一个半小时肯定是跑出去了。

可能之一:蛋白分子量太高了,跑得时间不够,条带没有跑开。可能之二:染色没有染好。可能之三:制胶时没有抽气,导致胶不平。可能之四:蛋白降解严重。可以试试低温电泳。

凝胶电泳为什么没有条带(凝胶电泳为什么没有条带显色)

电泳跑不出条带的原因可能有很多,以下是一些可能的原因: 样品中没有DNA,或者DNA太少,或者DNA已经降解。 DNA较小而电泳时间太长,导致DNA跑了出去。 DNA太大,还在加样孔附近,甚至还没有跑到胶里。

跑电泳时看不到结果可能有以下原因: 样品问题:样品可能没有充分提取或者制备过程中出现了问题,导致无法在电泳中显示出条带。

如果MARKER跑的出来很清晰,就不是胶的问题,我今天也碰到这个问题,有可能是引物不好,有可能体系不好,也有可能是天气原因,天气变化有可能显影需要的时间也不一样,如果体系,引物你都确定没有问题,就延长显影时间。

此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆操作。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。

凝胶电泳为什么没有条带(凝胶电泳为什么没有条带显色)

聚丙烯酰胺凝胶电泳跑蛋白质不出条带

如果marker中大分子量蛋白分离已经分开,而小分子量蛋白分不开,应该是胶浓度太低,孔径太大,所以25K和14K的蛋白所受阻力都太小,没有明显区别。可以增加分离胶浓度,一般15%左右就可以了。

如果不合适,仅调整分离胶的浓度的话,产物是看不出来的。你确定产物能跑出来?(打击你一下,有可能产物浓度过低,要知道SDSPAGE也是有分辨浓度问题的)有很多具体情况,建议你到丁香园上发这个帖子讨论吧。

蛋白用丙酮浓缩后跑电泳还是没有条带怎么办 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下, 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于同工酶的鉴定和提纯。

可能之一:蛋白分子量太高了,跑得时间不够,条带没有跑开。可能之二:染色没有染好。可能之三:制胶时没有抽气,导致胶不平。可能之四:蛋白降解严重。可以试试低温电泳。

凝胶电泳为什么没有条带(凝胶电泳为什么没有条带显色)

你的胶还能凝吗?看你的叙述,好像胶是可以凝的,那样的话和丙烯酰胺或者TBE就关系不大了,更大的可能是你的样品降解了。Marker跑出来了吗?如果marker能跑出来,就可以确定和胶或者TBE完全没有关系。

SDS法提取植物基因组DNA,经琼脂糖凝胶电泳没有看到条带的原因,

1、植物细胞有细胞壁,提取过程可能未破碎完全,导致释放的DNA浓度过低而不能被电泳检测到 2样品降解:提取过程机械振动过于剧烈,基因组DNA链断裂,二是操作过程中DNase污染,降解了DNA,反复冻融DNA也可造成降解。

2、首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确,如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则;检查电泳槽的电极是否出现移位、歪斜;考虑更换电泳缓冲液;电压不要太高,否则凝胶会受热。

3、原因很简单。样品里的目的片段DNA量太少,所以没有检测到。

4、如果琼脂糖能正常凝固,那变质可能性不大。如果连marker都看不见 如果不要求回收而只是看带,TBE可以不用灭菌,但是PH值要调,这影响DNA的迁移率。很有可能你的marker都没跑开。

5、点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。

6、条带短,能结合的EB(或其他染料)就少,所以相对长片段亮度就很弱,一般小于500就很难看清。解决方案,基本上楼上的都提到了:提高琼脂糖凝胶浓度到2%-3 跑个单酶切对照,有差异就表示有连接进去。

SDS法提取植物基因组DNA经琼脂糖凝胶电泳没有带的原因有哪些

1、植物细胞有细胞壁,提取过程可能未破碎完全,导致释放的DNA浓度过低而不能被电泳检测到 2样品降解:提取过程机械振动过于剧烈,基因组DNA链断裂,二是操作过程中DNase污染,降解了DNA,反复冻融DNA也可造成降解。

2、原因很简单。样品里的目的片段DNA量太少,所以没有检测到。

3、可能是荧光染料过期了或者用量不够,可以考虑在合适范围类适当加大用量或者用EB试试,EB毒性大,但是染色能力比低毒染料强。检查marker的保质期,单独跑一次marker,可能这个marker不行了。

4、首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确,如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则;检查电泳槽的电极是否出现移位、歪斜;考虑更换电泳缓冲液;电压不要太高,否则凝胶会受热。

5、加大上样量试试。另外,用试剂盒提取的话纯度都还算可以,自己手工提取的话会不会有降解或浓度太低了呢。不知道你的琼脂糖浓度是多少?我做的时候5%,我点2μL都会很亮,建议你用试剂盒提取试试。

6、点样空有没有东西?可能有蛋白污染,所以都堵在点样空,你看到的白色沉淀可能就是蛋白含量太高。2 操作太剧烈,活有DNase 污染,DNA都降解成小片段,跑出胶。

到此,以上就是小编对于凝胶电泳为什么没有条带显色的问题就介绍到这了,希望介绍的几点解答对大家有用,有任何问题和不懂的,欢迎各位老师在评论区讨论,给我留言。

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